Técnica de Edición Genómica: Reprogramación de la función y especificidad de las células T humanas con la orientación del genoma no viral

Mediante un sistema de seleccion de genomas CRISPR-Cas9 que no requiere vectores virales se inserta rapida y eficientemente secuencias de ADN grandes, más de un kb, a sitios de genomas de células T humanas. Se aplicó para corregir la mtación patógena de IL2RA, mismo gen que en la DM1 normalmente deberia codificar al receptor IL-2 (interleucina 2) en las células T reguladoras lo que conduce a una supresión de linfocitos T y a su apoptosis, sin embargo la carencia de IL-2 en pacientes con DM1 produce linfoproliferación y la depleción de células T reg lo que favorece al desarrollo de la enfermedad autoinmune. El metodo puede usar células frescas o crioconservadas de células T y células de sangre total o leucoféresis. La fusión de CD4-GFP fue expresado en las células T CD4. Estos resultados demuestran que varios genes endógenos pueden ser ingeniería directa sin virus en las células T y ese gen y proteína conservan los reglamentos. 

 

Con la orientación del genoma no viral  se pudo corregir la mutación y se observó que la expresión de del receptor IL-2 en la superficie de las células T estaba corregido gracias a las plantillas largas de dsADN. 

Referencias Bibliográficas

1. https://www.nature.com/articles/s41586-018-0326-5

2. https://www.revistanefrologia.com/es-genetica-diabetes-mellitus-articulo-X2013757511002452